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其他方法試劑盒

磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑盒-競爭法檢測
上海恒遠生物從事酶聯免疫學10年有余,技術成熟,產品穩定。恒遠品牌自主研發ELISA試劑盒,現已涵蓋20多個種屬,數千種產品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領域。其ELISA試劑盒不僅檢測指標豐富,還可以根據實驗需求定制檢測范圍,并且提供實驗外包與免費代測服務。歡迎您來電咨詢。

磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑


貨號:HB158-SH

規格:96T

價格:¥2500


本試劑盒僅供研究使用。

使用目的:

本試劑盒用于測定樣本中磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P的含量。

實驗原理

本試劑盒應用酶聯免疫競爭法測定標本磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P水平。用純化的磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P抗體包被微孔板,制成固相體,往包被單抗的微孔中加入磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P),和HRP標記的磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P抗原,使它們競爭結合,,經過徹底洗滌后底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P)的含量相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品磷脂酰肌醇3磷酸(PI3P的含量。  

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

 

 

8

標準品S1800 ng/L

0.5ml×1

2

酶標試劑

6ml×1

標準品S2400 ng/L

0.5ml×1

3

酶標包被板

12×8

標準品S3200 ng/L

0.5ml×1

4

顯色劑A

6ml×1

標準品S4100ng/L

0.5ml×1

5

顯色劑B

6ml×1

標準品S550ng/L

0.5ml×1  

6

終止液

6ml×1/

9

說明書

1

7

樣品稀釋液

6ml×1/

10

封板膜

2

 

標本要求 

1.標本處理:(1)水樣   采集后經 -20℃反復凍融三次,再經玻璃纖維過濾后,備查

2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,備查

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 加樣:分別設標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

2. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

7. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

8. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

詳細說明書請咨詢業務員!



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